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有關試劑盒標準曲線做不好有哪些原因原因
更新時間:2023-03-21   點擊次數:2282次

試劑盒被廣泛應用于各種抗原和抗體測定,但測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果,引起測定錯誤結果的原因主要有:

(1)試劑盒因素

(2)標本因素

(3)操作因素


試劑盒需要注意的事項是:

1. 在做完整的實驗過儀器之前,儀器預熱半小時,這個計算好時間,也可以直接將儀器一直開著,直到整個實驗結束。

2. 在加液過程中不要使槍頭觸及到板子底部,一般槍頭都懸空,可以將槍頭靠在孔邊緣,

3. 但槍頭尖懸空,如果槍頭上殘留液體看整體多少量,不要吹打下去,特別忌諱在版孔內壁流向版孔,整個加液過程不要產生氣泡(洗滌液除外)。


試劑盒標準曲線做不好的原因分析:

A、剛加完顯色劑時梯度明顯,顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的。

B、酶濃度太高,導致zui后顯色結果都是高的。

C、包被:酶標系統不匹配或者酶標的非特異反應太強,或者酶標儀讀數范圍不夠。

D、樣本中有能夠催化底物的物質,沒洗下來。

建議:包被、酶標重新做梯度,先用較低的濃度把梯度摸索好,然后再優化靈敏度,zui后調出所需的靈敏度、線性范圍。

建議:有條件的話,可以把酶免的蛋白系統移植到板式化學發光上,加完底物三分鐘讀數。

建議:蛋白系統靈敏度夠的話,顯色十分鐘就差不多了。

建議:酶是自己標的這種情況的,HRP比例不要太高。


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