技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > ELISA試劑盒實驗必須的的包被與封閉條件
ELISA試劑盒實驗必須的的包被與封閉條件
更新時間:2013-11-14   點擊次數(shù):1398次

 包被用抗原或抗體的濃度,包被的溫度和時間,包被液的pH等應(yīng)根據(jù)試驗的特點和材料的性質(zhì)而選定。抗體和蛋白質(zhì)抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液,也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。ELISA試劑盒通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置過夜,37℃中保溫2小時被認(rèn)為具有同等的包被效果。包被的zui適當(dāng)濃度隨載體和包被物的性質(zhì)可有很大的變化,每批材料需通過實驗與酶結(jié)合物的濃度協(xié)調(diào)選定。一般蛋白質(zhì)的包被濃度為100ng/ml-20ug/ml。
封閉(blocking)是繼包被之后用高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)溶液再包被的過程。抗原或抗體包被時所用的濃度較低,吸收后固相載體表面尚有未被占據(jù)的空隙,封閉就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙,從而排斥在ELISA其后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。封閉的手續(xù)與包被相類似。zui常用的封閉劑是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白,也有用10%的小牛血清或1%明膠作為封閉劑的。脫脂奶粉也是一種良好的封閉劑,其zui大的特點是價廉,ELISA試劑盒可以高濃度使用(5%)。高質(zhì)量的速溶食用低脂奶粉即可直接當(dāng)作封閉劑使用,但由于奶粉的成份復(fù)雜,而且封閉后的載體不易長期保存,因此在試劑盒的制備中較少應(yīng)用。

  封閉是否必要,取決于ELISA的模式及具體的實驗條件。并非所有的ELISA固相均需封閉,封閉不當(dāng)反而會使陰性本底增高。一般說來,雙抗體夾心法,只要酶標(biāo)記物是高活性的,操作時洗滌*,不經(jīng)封閉也可得到滿意的結(jié)果。特別是用單抗腹水直接包被時,因其中大量非抗體蛋白在包被時同樣也吸附在固相表面,業(yè)已起到了類似封閉劑的作用。ELISA試劑盒但在間接法測定中,封閉一般是不可少的(見2.2.2)。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或錫袋中,在低溫可保存數(shù)月。

上海通蔚生物科技有限公司

上海通蔚生物科技有限公司

地址:上海市金山區(qū)楓涇鎮(zhèn)環(huán)東一路65弄2號3463室

主營產(chǎn)品:ELISA檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒

©2019 版權(quán)所有:上海通蔚生物科技有限公司  備案號:滬ICP備14033764號-3  總訪問量:1134125  站點地圖  技術(shù)支持:環(huán)保在線  管理登陸

主站蜘蛛池模板: 日韩精品一区二区三区在线观看 | 91国内揄拍国内精品对白| 中文字幕日韩wm二在线看| 久久久久久久国产a∨| 久久久久久久99精品国产片| 久9久9精品免费观看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品软件| 中文字幕日韩人妻不卡一区| 三级视频在线播放| 一区二区三区四区免费视频| www日本在线观看| freesexvideos糟蹋hd| 538国产在线搬运工视频| 亚洲男人的天堂久久精品| 黄网站色视频免费观看| 色噜噜狠狠成人中文综合| 第九色区AV天堂| 欧洲mv日韩mv国产mv| 无敌小保子笔趣阁| 在线免费观看国产视频| 国产精品无码无在线观看| 国产成人久久精品区一区二区| 国产亚洲精品2021自在线| 国产一二在线观看视频网站| 向日葵app在线观看下载视频免费 向日葵app在线观看免费下载视频 | 99视频精品全部免费观看| 91麻豆国产在线观看| 北岛玲日韩精品一区二区三区 | 欧美成人免费全部观看天天性色| 国产国产人免费人成免费视频 | 国产美女在线一区二区三区| 国产精品毛片无遮挡| 国产成人污污网站在线观看| 欧美在线精品一区二区在线观看| 无码一区二区波多野结衣播放搜索| 国产普通话对白刺激| 97视频免费在线| 大肉大捧一进一出好爽视频| www.天天干.com| 小兔子好大从衣服里跳出来| 一级美国乱色毛片|