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ELISA試劑盒延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間
更新時(shí)間:2015-02-05   點(diǎn)擊次數(shù):2230次

    ELISA試劑盒約40分鐘顯色達(dá),隨即逐漸減弱,至2小時(shí)后即可*消退至無(wú)色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類(lèi)終止劑尚能使藍(lán)色維持較長(zhǎng)時(shí)間(12-24小時(shí))不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類(lèi)酸性終止液則會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成,此時(shí)可用特定的波長(zhǎng)(450nm)測(cè)讀吸光值。

    ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中顯色是ELISA試劑盒中的zui后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無(wú)色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在一定時(shí)間內(nèi),陰性孔可保持無(wú)色,而陽(yáng)性孔則隨時(shí)間的延長(zhǎng)而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測(cè)定中,ELISA試劑盒加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測(cè)定的顯色可在室溫進(jìn)行,時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制,有時(shí)可根據(jù)陽(yáng)性對(duì)照孔和陰性對(duì)照孔的顯色情況適當(dāng)縮短或,及時(shí)判斷。

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