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關(guān)于ELISA試劑盒實驗控制問題詳解
更新時間:2013-11-27   點擊次數(shù):1242次


ELISA試劑盒質(zhì)量控制(Quaility Control,Q.C)
質(zhì)量控制是監(jiān)視全過程,排除誤差,防止變化,維持標準化現(xiàn)狀的一個管理過程。這
一過程是通過一個反饋環(huán)路進行的。
1)確定控制的對象;
2)規(guī)定控制對象的標準(預期值);
3)制定或選擇控制方法和手段;
3)測量實際數(shù)據(jù);
4)比較或較對實際數(shù)據(jù)與預期值之間的差異,并說明產(chǎn)生這一差異的原因。超出預    定誤差范圍,報警系發(fā)出信號,反饋通道中斷。
5)采取行動,解決差異?;謴驮瓲睿ㄔ瓨藴薁顟B(tài))的手段發(fā)揮作用。
質(zhì)量控制主要采用質(zhì)控圖進行。質(zhì)控圖是把某一檢驗的性能數(shù)據(jù)與所計算出來的預期的"控制限"進行比較的圖。這種性能數(shù)據(jù)是在按規(guī)程正常進行時,按時間順序而抽選出來的,其目的是檢測檢驗過程中變異的"可追查"性原因。"可追逆"性的誤差原因,ELISA試劑盒是指除去隨機誤差以外的其他原因。"控制限"是通過統(tǒng)計計算出來的,在后我們將詳細介紹(見3室內(nèi)質(zhì)控程序)。
 
2 誤差
實驗誤差分為三種:系統(tǒng)誤差、隨機誤差和過失誤差。
系統(tǒng)誤差是指一系列測定結(jié)果與真值或靶值存在有同一傾向的誤差,有明顯的規(guī)律性,可在一定條件下重復出現(xiàn),是可以通過質(zhì)控預防和校正的。
隨機誤差又稱偶然誤差,是一種偶然的、未能預料到的誤差,是難以避免和校正的誤差。檢驗工作中隨機誤差的分布符合正態(tài)分布規(guī)律。
過失誤差是人為的責任誤差。通過加強實驗室管理和開展質(zhì)量控制工作是可以避免的。
 
3 正態(tài)分布及標準差
ELISA試驗中,檢驗同一樣本達20次以上時,就會發(fā)現(xiàn)這組數(shù)據(jù)(指測定結(jié)果的吸光值)分布在均值兩側(cè),大部分集中在均值附近。如果以測定值為橫坐標,以出現(xiàn)的頻率為縱坐標作圖,就可繪出一個呈鐘形的曲線圖。如圖5-1,鐘頂處為均值,其他值以均值為中心對稱分布,這就是正態(tài)分布。
 
 
 
正態(tài)曲線以下的面積稱概率,常用樣本的均數(shù)(X)和標準差(SD)來表示,其計算方法如下:
 
均值、標準差和概率的關(guān)系如下:
X±1SD,概率0.68    X±2SD,概率0.95    X±3SD,概率0.99
 
 
換言之,當ELSIA檢測同一樣本達一定次數(shù)后所得的一組數(shù)據(jù),其中靠近均值(X)的
±1SD范圍內(nèi)的數(shù)據(jù),占該組數(shù)據(jù)的68%,在X±2SD范圍內(nèi)分布的數(shù)據(jù)占總體的95%,在X±3SD范圍內(nèi)分布的數(shù)據(jù)占總體的99%。當我們要求檢驗結(jié)果在X±2SD范圍內(nèi)為合格時,將有95%的數(shù)據(jù)可能合格。
 
4 真值
用確切的、的決定性方法測得的值,稱為真值。真值一般是測不到的。通過可靠的決定性方法測出的值,稱為靶值,通常用靶值來表示真值的大小。
 
5 ELISA試劑盒準確度(accuracy)
是指測定結(jié)果與真值(或靶值)接近的程度。準確度不能以數(shù)字表示,往往用不準確度來衡量。測定結(jié)果與靶值的偏離程度稱為偏差,它表示該項檢驗的不準確度。
偏差=檢驗的均值-真值(或靶值)
相對偏差=偏差真值÷(或靶值)×100%
 
6 精密度(Precision)
是指對同一樣本重復測定時,每次牛ELISA試劑盒測定結(jié)果與平均值的接近程度,即重復測定值之間的符合程度。
 
7 標準品
1、標準品 由WHO或相應組織標定的,用肯定的、ELISA試劑盒*的、準確的物理或化學方法  測定的定值材料。
2、生物學活性標準品根據(jù)生物學反應由WHO或相應組織標定的活性單位的材  料。
3、參考標準血清 國家標準化組織根據(jù)標準化生產(chǎn)的法定材料??捎糜阼b定儀器和  鑒定方法準確性。 
 
8 臨床決定性水平(clinical decision leuel)
當某個被測物的濃度達到某一水平時,臨床醫(yī)師必須采用醫(yī)療措施。被測物的這濃度稱為臨床決定性水平。
 

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