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關于免疫熒光ELISA試劑盒實驗要點詳解
更新時間:2013-11-29   點擊次數:1554次

  將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。ELISA試劑盒其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。

  免疫熒光ELISA試劑盒體技術(熒光顯微鏡技術)抗原抗體反應后,利用熒光顯微鏡判定結果的檢測方法。抗原抗體反應后,利用特殊儀器測定熒光強度而推算被測物濃度的檢測方法 。
(1)熒光物質  許多物質都可產生熒光現象,ELISA試劑盒但并非都可用作熒光色素。只有那些能產生明顯的熒光并能作為染料使用的有機化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染料。
(2)異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)為或橙結晶粉末,易溶于水或酒精等溶劑。分子量為389.4,zui大吸收光波長為490--495nm,zui大發射光波長520--530nm,呈現明亮的黃綠色熒光,結構式如下:   有兩種同分異結構,其中異構體Ⅰ型在效率、穩定性、與蛋白質結合能力等方面都更好,在冷暗干燥處可保存多年,是應用zui廣泛的熒光素。

  免疫熒光ELISA試劑盒技術特點:
該技術的主要特點是:特異性強、敏感性高、速度快。
主要缺點是:非特異性染色問題尚未完*,結果判定的客觀性不足,技術程序也還比較復雜。    熒光免疫法按反應體系及定量方法不同,還可進一步分做若干種。與放射免疫法相比,熒光免疫法無放射性污染,并且大多操作簡便,便于推廣。國外生產的TDM用試劑盒,有相當一部分即屬于此類,并且還有TDM熒光偏振免疫分析用的自動分析儀生產。   ELISA試劑盒由于一般熒光測定中的本底較高等問題,熒光免疫技術用于定量測定有一定困難。近年來發展了幾種特殊的熒光免疫測定,與酶免疫測定和放射免疫分析一樣,在臨床檢驗中應用。

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